09.05.2015
ПРИМЕНЕНИЕ ИЗОТОПНОЙ МЕТКИ
Рубрика: МикромирАвтор: admin
Если к растущей популяции клеток добавить интермедиат биосинтеза (например, какую-нибудь аминокислоту), то он будет препятствовать эндогенному синтезу этого интермедиата.
Следовательно, экзогенное соединение включается клеткой в цепь реакций, ведущих к образованию конечного продукта биосинтеза, предпочтительнее, чем эндогенное.
Если внесенное в среду вещество помечено радиоактивным изотопом, то при химическом фракционировании меченых клеток можно исследовать распределение радиоактивности в конечных продуктах биосинтеза.
Такие эксперименты показывают, например, что С-глутаминовая кислота включается в белок не только как глутаминовая кислота, но и в виде остатков двух других аминокислот — аргинина и пролина. Это означает, что глутаминовая кислота служит предшественником при биосинтезе аргинина и пролина.
Еще один важный метод использования радиоизотопов — импульсная метка. В растущую культуру ненадолго вносят радиоактивный предшественник биосинтеза. В течение этого времени небольшое количество предшественника входит в клетку и вступает в начальные реакции различных путей биосинтеза, в которых участвует данный предшественник.
Если отбирать образцы клеточного материала через различные промежутки времени после введения импульсной метки и подвергать их химическому фракционированию, то можно выявить последовательность химических превращений в тех путях биосинтеза, которые начинаются с этого вещества.
Именно с помощью таких экспериментов был в основном установлен путь превращения СО2 в органические вещества в фотосинтезирующих организмах и хемоавтотрофах.
При воздействии радиоактивного СО2 на эти организмы метка включается прежде всего в фосфоглицериновую кислоту; так было установлено, что она является продуктом первичной реакции включения СО2.
Радиоизотопные методы применяются также для обнаружения продуктов биосинтетических реакций в бесклсточных системах, в которых скорости реакций иногда слишком малы и за реакциями трудно следить с помощью обычных химических методов.
Методы с использованием радиоактивных изотопов были незаменимы в ранних исследованиях синтеза белка.
Вас также заинтересует это:
Comments (0)
Комментариев нет
Нет комментариев.
